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产品介绍 随着生命科学研究从“群体层面” 向 “单细胞层面” 纵深推进,传统 Bulk RNA-seq 仅能呈现细胞群体的平均基因表达水平,无法解析细胞异质性、微环境特异性分子变化等关键科学问题。而单细胞 RNA-seq(scRNA-seq)技术通过捕获单个细胞的基因表达谱,精准区分细胞亚群、挖掘稀有细胞类型、追溯细胞分化轨迹,已成为肿瘤机制研究、免疫调控分析、发育生物学谱系追踪等领域的核心技术支撑。 作为单细胞测序领域的“行业金标准”,10x Genomics 旗下Chromium Controller的全新升级版本10x Chromium iX平台凭借成熟的微流控技术、高效的分子标记体系及稳定的检测性能,成为全球科研团队的首选工具。该系统配备8通道检测模块,不仅完美兼容原有3’/5’表达谱、ATAC及多组学联合检测等经典应用,更可适配全新V4试剂,实现技术能力的全面跃升。该平台可实现大规模细胞的快速捕获与精准测序,广泛应用于肿瘤异质性解析、免疫细胞功能分型、疾病标志物筛选、类器官发育研究等方向,为生命科学与医学转化研究提供高分辨率的技术解决方案。
分析原理 单细胞转录组测序系统的关键技术是利用上百万独特的Barcode标记不同的样品细胞。首先,含有Barcode序列的Gel beads与样品和酶的混合物混合,然后与油表面活性剂结合形成GEMs(Gel Bead-In-Emulsions,意为包裹Gel beads,样品以及酶的混合物的油滴)。收集GEMs流到储液器,Gel beads溶解释放Barcode序列,开始对样本细胞进行标记。将每个液滴中含有Barcode信息的产物混合,构建标准测序文库。 从细胞样品提取到最终数据获得,样品检测、建库、测序等每一环节都会直接影响数据的数量和质量,从而影响后续信息分析的结果。为从源头保证测序数据准确可靠,凌恩生物承诺在项目所有生产环节都严格把关,从根源上确保高质量数据的产出。单细胞转录组整体实验流程图如下:
图单细胞转录组测序实验流程 技术流程
技术优势 1、捕获率高:单次可处理数万级细胞,有效降低实验批次效应; 2、捕获效率与灵敏度高:运行时间短,细胞回收率高达80%,基因中位数最大可获得前代的2倍。同时改进了对稀有转录本、脆弱细胞和RNA含量低的细胞的捕获; 3、稳定性好:批次间差异小,重复性好; 4、多胞率极低:多细胞比例减半(每1,000个细胞多胞率为0.4%),GEM生成更高效,同时不增加细胞应激。 送样要求 1、新鲜样品:用提前4℃预冷的1 × DPBS或生理盐水清洗后,立即置于保存液中。 2、送样量要求:新鲜组织采集量≥ 0.2g(组织体积大小约2×0.5cm3);组织较大时,可分割为多颗粒(每颗粒≤ 0.5cm3大小)进行保存运输;细胞数目≥ 1 × 105个,细胞状态良好,杂质含量低,细胞活率好,无污染; 3、运输要求:将保存液保存的组织放置于2 ℃~8 ℃保存或运输,保存及运输的时间建议不超过72 h。 分析示例
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