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产品介绍 单细胞核转录组测序(single-nucleus RNA-seq,snRNA-seq)是针对单个细胞核内的转录本进行扩增和高通量测序的一项新技术。该技术可以精准获得每个细胞的表达谱特征,揭示细胞异质性,发现新的亚型、研究细胞发育和分化过程、探索细胞类型和功能,对深入了解样本中细胞间的类型划分和相互作用意义深远,是研究细胞基因表达异质性、发育分化过程、机制研究、环境响应、医学及农业育种等的重要手段。 分析原理 DNBelab C-TaiM4单细胞3’转录组产品采用液滴微流控原理,将带有标签引物的捕获磁珠体系和单个细胞核体系包裹在油相液滴中;与传统GEMs体系不同的是,C-TaiM4采用双微珠捕获识别实现对polyA结构的mRNA进行充分捕获:Cell Beads用于mRNA的捕获,Index Carrier微珠用于根据同液滴中带有相似标签引物的强相关性识别、合并Cell Beads,提升有效液滴数量。
图 DNBelab C-TaiM4单细胞平台实验原理 实验流程 从细胞核样品提取到最终数据获得,样品检测、建库、测序等每一环节都会直接影响数据的数量和质量,从而影响后续信息分析的结果。为从源头保证测序数据准确可靠,凌恩生物承诺在项目所有生产环节都严格把关,从根源上确保高质量数据的产出。单细胞核转录组整体实验流程图如下:
图 单细胞核转录组测序实验流程 技术流程
技术优势 1. 样本兼容性广泛:包含动物及植物细胞核样本,可适用于冻存样本以及直径较大的细胞。 2. 低多胞率:1,000细胞/0.4%。 3. 实验稳定性良好:批次间差异较小,重复性佳。 4. 数据质量卓越:通过直接抽核,有效降低细胞偏好性,能够捕获稀有细胞以及新的 Marker 基因。同时,避免了酶消化应激,完整保留转录本异构体信息。 5. 性价比高:在同等经费条件下,大队列研究可纳入更多样本。 送样要求 1、脑、心脏、肌肉等含有直径大于40μm细胞的组织类型,关注肝实质细胞、肾小球足细胞等特殊细胞的组织类型。 2、送-80℃冷冻保存或过液氮的组织或细胞。建议冻存时间不宜过长。 3、组织或细胞送样量的要求:送200mg或以上,大小为0.5cm3。 分析示例
凌恩生物人&动物&植物单细胞项目经验 (部分数据)
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