平台使用 ABI ViiA7和ABI7900实时荧光定量PCR仪，用染料法或Taqman探针法对lncRNA 进行Real Time PCR定量测定。技术灵敏度高、线性范围宽、特异性好、重复性佳。

优势

·  实时监测：通过扩增曲线能够实时地观察到产物的增加，直观地看到反应对数期

·  到达阈值的循环数和样品的起始模板浓度之间呈线性关系，减少假阴性、假阳性的出现

·  采用先进的分析软件，结果分析更加快捷

·  严谨的科学态度，进行熔解曲线终点分析，验证扩增产物的特异性

特色

·  最先进的设计软件，确保探针及引物设计的特异性

·  探针法或染料法定量分析，一切以客户需求为导向

·  探针合成委托国内最好的合成公司，确保探针质量

·  染料法采用2 -ΔΔc(t) 法，操作简便，节约时间

·  正式实验前先进行预实验，慎重对待客户的委托

·  普通PCR无扩增条带的基因，保证再做一次重复验证

·  报告详尽，数据可靠，结果真实，实验科学

内容

1. 制定个性化实验方案：根据不同的实验目的确定适合实验方法、选定合适的内参；

2. 样本抽提及质检：对客户提供样本进行RNA抽提，并利用NanoDrop进行样本质检；

3. 定量PCR预实验：包括样本反转录为cDNA、配置PCR反应体系及进行Real-Time PCR反应；

4. 正式定量PCR实验：根据预实验结果进行正式实验；

5. 数据分析：采用2 -ΔΔc(t) 法进行分析，比较不同样本间差异。

要求

1. 需提供新鲜的且尽量多的材料，或直接提供纯化好的总RNA（总量大于 2 μg/ 样品）

2. 请通过E-mail提供检测的lncRNA序列

操作流程

1. 根据lncRNA序列设计特异性引物和荧光探针；如果是用染料法，则只需设计特异性的引物；

2. 提取合格的RNA ；

3. 开展预实验；

4. 荧光定量PCR，进行实验结果分析；

5. 实验完成后，提供完整的实验报告（含软件分析结果）及引物等实验材料。

数据展示

扩增曲线(Amplification Curves)

熔解曲线(Melting Peaks)