021-31021022 ;15850554146
产品介绍

微生物多样性测序,又名扩增子测序是对特定长度的PCR产物或者捕获的片段进行测序,主要包括16S rDNA测序、18S rDNA测序、ITS测序及目标区域扩增子测序等。采用第二代高通量测序平台测定的16S/18S /ITS某个高变区域的序列,来反映环境样品在细菌、真菌、古菌分类方面物种之间的差异,对研究海洋、土壤、肠道粪便等环境中的微生物构成有重要的指导作用。

微测1.png

凌恩生物根据不同的研究目的和需求,扩增子测序可以细分为如下4个产品:

16S rDNA测序:16S rDNA为编码原核生物核糖体小亚基rRNADNA序列,主要进行细菌或古菌的多样性分析细菌核糖体RNA(rRNA)有三种类型:5S rRNA(120bp)16S rRNA(约1540bp)和23S rRNA(约2900bp)。5S rRNA基因序列较短,包含的遗传信息较少,不适于细菌种类的分析鉴定;23S rRNA基因的序列太长,且其碱基的突变率较高,不适于鉴定亲缘关系较远的细菌种类;16S rRNA普遍存在于原核细胞中,且含量较高、拷贝数较多(占细菌RNA总量的80%以上),便于获取模板,功能同源性高,遗传信息量适中,适于作为细菌多样性分析的标准。16S rRNA编码基因序列共有10个保守区和9个高可变区。

微测2.png

18S rDNA测序:18S rDNA为编码真核生物核糖体小亚基rRNADNA序列,反映样品中真核生物之间的种类差异。与细菌多样性分析类似,在真核微生物中也有三类核糖体RNA(rRNA),包括5.8S rRNA18S rRNA28S rRNA18S rRNA基因是编码真核生物核糖体小亚基的DNA序列,其中既有保守区,也有可变区(V1-V9,没有V6区)。保守区域反映了生物物种间的亲缘关系,而可变区则能体现物种间的差异,适用于作种级及以上的分类标准。

微测3.png

ITS测序:该类测序主要对环境微生物中的真菌多样性进行分析。包含两个区域:ITS1位于真核生物核糖体rDNA序列18S5.8S之间;ITS2位于真核生物核糖体rDNA序列5.8S28S之间。 ITS序列是内源转录间隔区(Internally Transcribed Spacer),位于真菌18S5.8S28S rRNA基因之间,分别为ITS 1ITS 2。在真菌中,5.8S18S28S rRNA基因具有较高的保守性,而ITS由于承受较小的自然选择压力,在进化过程中能够容忍更多的变异,在绝大多数真核生物中表现出极为广泛的序列多态性。同时,ITS的保守型表现为种内相对一致,种间差异较明显,能够反映出种属间,甚至菌株间的差异。并且ITS序列片段较小(ITS 1ITS 2长度分别为350 bp400 bp),易于分析,目前已被广泛用于真菌不同种属的系统发育分析。

微测4.png微测5.png

功能基因扩增子测序:根据客户的研究需求,基于功能基因/持家基因/靶基因等,对特定基因的PCR产物进行测序。在自然界的各类环境中,都有微生物的存在,它们在各自的“岗位”上都发挥着或大或小、或多或少的作用。有一些具有特殊功能的微生物,由于其作用的重要性或特殊性而受到人们的广泛关注,这些具有特殊功能的微生物叫做功能微生物,如氨氧化细菌、硫细菌、硝化细菌等。它们在分类学上有可能差异很大,但却具有相同或类似的基因使其能够发挥同样的作用。支配这些功能细菌发挥重要功能的基因被称为功能基因,如amoAdsrBnxrA。目前凌恩生物已收集GeneBank中所有已知功能基因的序列及其对应的种属信息,构建自己的功能基因数据库。


技术流程(两大技术平台)

Illunima测序:

微测6.png

PacBio测序(扩增子全长测序):

微测7.png


内容项目引物名称序列扩增产物长度
全长16S 全长27F5′-AGRGTTTGATYNTGGCTCAG-3′1.5K
1492R5′-TASGGHTACCTTGTTASGACTT-3′1.5K
18S全长EukA5′-AACCTGGTTGATCCTGCCAGT-3′1.8K
EukB5′-GATCCTTCTGCAGGTTCACCTAC-3′1.8K
ITS 全长ITS15′- CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA-3′0.6-0.7K
ITS45′- TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′0.6-0.7K



分析流程

扩增子项目流程图-20220831-宣传用_01.jpg



送样要求


样品类型1:环境样本(请使用干冰或者冰袋运送)

1土壤5g

2粪便2g

样品类型2DNA样品(请使用干冰或者冰袋运送)

1DNA总量150ng

2)浓度5ng/ul



技术特色


  • 两大测序平台,满足不同多样性检测需求

  • 多种可选引物,针对不同微生物类型研究方向

  • 1对1项目服务,直接对接生信分析师,没有中间环节,沟通更高效

  • 多组学关联分析,可关联代谢组,蛋白组研究结果,全方面深化研究

  • 多种个性化分析方案,全方位满足研究需要,助力科研成功



分析示例

未标题-1.jpg



项目经验(近期部分客户文章)

  • 二代16s rRNA

1 Phage combination therapies for bacterial wilt disease in tomato.Nature BiotechnologyIF=31.8642019

2 Antimicrobial PCMX facilitates the volatile fatty acids production during sludge anaerobic fermentation: Insights of the interactive principles, microbial metabolic profiles and adaptation mechanisms.Chemical Engineering JournalIF=16.7442022

3 Long-term efect of epigenetic modifcation in plantmicrobe interactions: modifcation of DNA methylation induced by plant growth promoting bacteria mediates promotion process.MicrobiomeIF=14.652022

4 Competition for iron drives phytopathogen control by natural rhizosphere microbiomes.Nature MicrobiologyIF=14.32020

5 Toward emerging contaminants removal using acclimated activated sludge in the gravity-driven membrane filtration system.Journal of Hazardous MaterialsIF=14.2242022

6 Diversity, function and assembly of the Trifolium repens L. root-associated microbiome under lead stress.Journal of Hazardous MaterialsIF=14.2242022

7 Combined remediation effects of biochar and organic fertilizer on immobilization and dissipation of neonicotinoids in soils.Environment InternationalIF=13.3522022

8 Multiple hydrolyses of rice straw by domesticated paddy soil microbes for methane production via liquid anaerobic digestion.Bioresource TechnologyIF=11.8892022

9 Upgrading volatile fatty acids production from anaerobic co-fermentation of orange peel waste and sewage sludge: Critical roles of limonene on functional consortia and microbial metabolic traits.Bioresource TechnologyIF=11.8892022

10 Small changes in rhizosphere microbiome composition predict disease outcomes earlier than pathogen density variations.ISMEIF=11.2172022

11 Dietary selection of metabolically distinct microorganisms drives hydrogen metabolism in ruminants.ISMEIF=11.2172022

12 Suppression of the insect cuticular microbiomes by a fungal defensin to facilitate parasite infection.ISMEIF=11.2172022

  • 三代16s rRNA

1 ETS-1 facilitates Th1 cell-mediated mucosal inflammation in inflammatory bowel diseases through upregulating CIRBP.Journal of AutoimmunityIF=14.5112022

2 Small Intestine-specific Knockout of CIDEC Improves Obesity and Hepatic Steatosis by Inhibiting Synthesis of Phosphatidic Acid.Int. J. Biol. SciIF=10.752022

3 Bacterial dynamics of drinking water pipeline: A new perspective on dual effects of stagnation and algal organic matter.Water ResearchIF=9.132022

4 Bacterial community structure and metabolic activity of drinking water pipelines in buildings: A new perspective on dual effects of hydrodynamic stagnation and algal organic matter invasion.Water ResearchIF=9.132022

5 Linarin ameliorates dextran sulfate sodium-induced colitis in C57BL/6J mice via the improvement of intestinal barrier, suppression of inflammatory responses and modulation of gut microbiota.Food FunctIF=6.3172022

6 Heat Stress Weakens the Skin Barrier Function in Sturgeon by Decreasing Mucus Secretion and Disrupting the Mucosal Microbiota.Frontiers in MicrobiologyIF=6.0642022

7 The Gut Microbial Co-Abundance Gene Groups (CAGs) Differentially Respond to the Flavor (Yao-Wei) of Chinese Meteria Medica.AM J CHINESE MEDIF=6.0052022

关于我们

邮 箱:lab@biozeron.com

电 话:021-31021022 ;15850554146

地 址:上海市嘉定工业区兴贤路1180号7幢3层

网 址:http://www.biozeron.com

邮 编:201800

上海凌恩生物科技有限公司2014年成立于上海,是一家从事生物科研技术服务的高科技公司,专注于二代高通量测序与三代单分子测序服务在科研与人类健康领域的应用和研究。

       公司以北京大学、南京大学以及中国科学院等国内外高等院校与科研院所的专家教授作为技术依托,吸纳多名在生物信息高级技术人员的加盟,参与并完成多个高科技 项目。目前的研究成果发表在Nature、Cell、PNAS等国际顶尖学术期刊。随着二代测序的普及和三代测序的方兴未艾,上海凌恩以打造国内一流测序服务与试剂研发服务团队为目标,努力推进我国的基因组学科研与其在人类健康与农业领域的深度应用与发展。




友情链接:南京英瀚斯